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名称Hs 578T(人乳腺癌细胞)(STR鉴定正确)

别称HS 578T;Hs-578T;HS-578T;Hs_578t;Hs-578-T;HS-578-T;Hs 578.T;HS578T;Hs578T;Hs578t;HS0578T;578T;HS578;Hs578;Homo sapiens No.578,tumor cells

种属人

年龄（性别）女；74岁

组织来源乳腺癌

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

背景描述Hs 578T细胞源自乳房癌，它与正常成纤维细胞样细胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T细胞**初是多角形的，但在传代过程中选择并克隆了星形的细胞形态。电镜下观察发现，Hs 578T细胞内酪蛋白颗粒聚集、桥粒紧密连接、脂质体和光滑内质网小泡。Hs 578T细胞与Hs 578Bst细胞一样，未检测到雌激素受体和内生病毒。

生物安全等级1

生长培养基DMEM＋0.01mg/ml Insulin＋10%FBS＋1%P/S

推荐传代比例1:3-1:4

推荐换液频率2~3次/周

倍增时间~36-54 hours

冻存条件冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

致瘤性No,in immunosuppressed mice.Yes,in semisolid medium.

保藏机构ATCC;CRL-7849 ATCC;HTB-126 BCRC;60120 DSMZ;ACC-781 ECACC;86082104

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备DMEM培养基；北美胎牛血清，10%；添加0.01mg/ml牛胰岛素；双抗，1%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。**天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。